經(jīng)方_1區(qū)：中南大學(xué)湘雅醫(yī)院揭示血府逐瘀湯通過tRF-3-Leu-AAG/Gpr17軸改善顱腦損傷后的神經(jīng)炎癥

【寫在前面】：本期推薦的是由中南大學(xué)湘雅醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合科中西醫(yī)結(jié)合研究所、中南大學(xué)湘雅醫(yī)院中醫(yī)藥跨學(xué)科研究中心、中南大學(xué)湘雅醫(yī)院國(guó)家老年病臨床研究中心等研究團(tuán)隊(duì)合作近期發(fā)表于Phytomedicine(IF11.3）的一篇文章，揭示血府逐瘀湯通過tRF-3-Leu-AAG/Gpr17軸改善顱腦損傷后的神經(jīng)炎癥。

【期刊簡(jiǎn)介】

【題目及作者信息】

Xuefu Zhuyu Decoction Ameliorates Neuroinflammation after Traumatic Brain Injury via tRF-3-Leu-AAG/Gpr17 axis

背景

血府逐瘀湯（XFZYD）基于其活血化瘀的傳統(tǒng)功能，臨床應(yīng)用于創(chuàng)傷性腦損傷（TBI）。然而，人們對(duì)其功效的確切機(jī)制，特別是通過表觀遺傳調(diào)控，知之甚少。

研究目的

我們假設(shè)XFZYD在TBI后的神經(jīng)保護(hù)作用是通過調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)移RNA衍生的小RNA（tsRNAs）介導(dǎo)的，tsRNAs是一類關(guān)鍵的表觀遺傳調(diào)節(jié)因子。本研究旨在描繪XFZYD減輕神經(jīng)炎癥和促進(jìn)神經(jīng)恢復(fù)能力的特定tsRNA依賴性分子途徑。

材料與方法

我們采用了用XFZYD治療的小鼠TBI模型。在對(duì)神經(jīng)、組織病理學(xué)和炎癥結(jié)果進(jìn)行全面評(píng)估以測(cè)試小鼠行為后。在體內(nèi)和體外研究了tRF-3-Leu-AAG的抗炎癥作用。RNA測(cè)序和生物信息學(xué)分析表明，G蛋白偶聯(lián)受體17（Gpr17）是tRF-3-Leu-AAG的靶標(biāo)。tRF-3-Leu-AAG和Gpr17之間的直接相互作用通過雙熒光素酶測(cè)定得到驗(yàn)證。最后，體外拯救實(shí)驗(yàn)最終確定tRF-3-Leu-AAG/Gpr17軸是XFZYD作用的功能途徑。

結(jié)果

XFZYD給藥顯著減輕了TBI后的神經(jīng)功能缺損、神經(jīng)元損失，并挽救了認(rèn)知障礙。tRF-3-Leu-AAG是一種關(guān)鍵的介質(zhì)，被TBI抑制，被XFZYD上調(diào)。該研究表明tRF-3-Leu-AAG影響炎癥反應(yīng)。關(guān)鍵的是，XFZYD的抗炎和神經(jīng)保護(hù)作用完全依賴于tRF-3-Leu-AAG。我們通過將Gpr17鑒定為tRF-3-Leu-AAG的直接和功能靶點(diǎn)，進(jìn)一步描繪了下游信號(hào)傳導(dǎo)。XFZYD介導(dǎo)的tRF-3-Leu-AAG結(jié)合Gpr17 mRNA的3′UTR以抑制其表達(dá)，從而抑制Gpr17誘導(dǎo)的促炎途徑。

結(jié)論

本研究闡明，XFZYD通過tRF-3-Leu-AAG/Gpr17軸在TBI后發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)和抗炎作用。我們的研究結(jié)果為XFZYD治療TBI的應(yīng)用提供了現(xiàn)代科學(xué)依據(jù)。

圖文摘要

【前言】

創(chuàng)傷性腦損傷（TBI）是一個(gè)主要的全球健康問題，也是全球慢性殘疾和死亡的主要原因。其復(fù)雜的病理生理學(xué)涉及一系列相互關(guān)聯(lián)的細(xì)胞和分子事件，其中神經(jīng)炎癥在驅(qū)動(dòng)繼發(fā)性腦損傷和決定神經(jīng)功能恢復(fù)的預(yù)后方面占據(jù)核心地位。TBI通過觸發(fā)駐留小膠質(zhì)細(xì)胞的激活、誘導(dǎo)細(xì)胞因子釋放和促進(jìn)外周循環(huán)免疫細(xì)胞浸潤(rùn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)來引發(fā)繼發(fā)性損傷，從而加劇持續(xù)的病理炎癥。作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）中的主要先天免疫細(xì)胞，小膠質(zhì)細(xì)胞作為前線防御群體，在TBI反應(yīng)中經(jīng)歷快速的功能激活。中度小膠質(zhì)細(xì)胞活化有助于碎片清除和組織修復(fù)，但持續(xù)和過度的小膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)會(huì)通過過度分泌促炎介質(zhì)（包括TNF-α、IL-1β和IL-6）加劇神經(jīng)元和突觸損傷。因此，精確調(diào)節(jié)小膠質(zhì)細(xì)胞功能狀態(tài)和抑制不受控制的神經(jīng)炎癥對(duì)于減輕TBI后的繼發(fā)性腦損傷和改善長(zhǎng)期預(yù)后至關(guān)重要。

血府逐瘀湯是一種經(jīng)典的中藥方劑，已被廣泛應(yīng)用于TBI的臨床干預(yù)。臨床前研究證實(shí)了XFZYD的神經(jīng)保護(hù)特性，主要是通過其抑制腦損傷后異常神經(jīng)炎癥的能力。我們之前的工作還證實(shí)，XFZYD治療重塑了小膠質(zhì)細(xì)胞的反應(yīng)性，并抑制了TBI后的神經(jīng)炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)，表明其對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞功能穩(wěn)態(tài)具有強(qiáng)大的調(diào)節(jié)作用。值得注意的是，最近的研究表明，XFZYD可以重塑tsRNA表達(dá)譜，并在TBI進(jìn)展過程中介導(dǎo)tsRNA相關(guān)的信號(hào)通路。我們發(fā)現(xiàn)tRF-3-Leu-AAG是TBI后下調(diào)的關(guān)鍵介質(zhì)，XFZYD治療后顯著上調(diào)。因此，探索XFZYD調(diào)節(jié)tRF-3-Leu-AAG重塑小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的調(diào)控機(jī)制將有助于進(jìn)一步闡明XFZYD介導(dǎo)的TBI神經(jīng)保護(hù)的分子基礎(chǔ)。

在本研究中，我們證明了tRF-3-Leu-AAG表達(dá)的升高有效地抑制了神經(jīng)炎癥，增強(qiáng)了抗炎和穩(wěn)態(tài)標(biāo)志物的表達(dá)，而tRF-3-Leu-AAG的敲除增強(qiáng)了促炎反應(yīng)，上調(diào)了有害的炎癥基因表達(dá)。體內(nèi)和體外證據(jù)均證實(shí)，XFZYD以tRF-3-Leu-AAG依賴的方式改善TBI模型中的神經(jīng)缺陷并減輕神經(jīng)炎癥。通過轉(zhuǎn)錄組測(cè)序和生物信息學(xué)預(yù)測(cè)，篩選并鑒定Gpr17為tRF-3-Leu-AAG的核心下游靶點(diǎn)，并通過雙熒光素酶報(bào)告檢測(cè)進(jìn)一步驗(yàn)證tRF-3-亮氨酸-AAG和Gpr17之間的直接結(jié)合。從機(jī)制上講，XFZYD上調(diào)tRF-3-Leu-AAG以轉(zhuǎn)錄抑制Gpr17，從而限制過度的小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥并促進(jìn)TBI后的神經(jīng)組織修復(fù)。總之，我們的研究結(jié)果表明，XFZYD通過tRF-3-Leu-AAG/Gpr17調(diào)節(jié)軸減輕TBI后神經(jīng)炎癥并促進(jìn)神經(jīng)恢復(fù)。

【結(jié)果部分】

1.通過LC-MS/MS在正離子模式(A)和負(fù)離子模式(B)下分析樣品所得代表性總離子色譜圖（TICs）。峰鑒定：A，羥基黃花黃A；B，新橙皮苷；C，杏仁苷；D，阿魏酸；E，芍藥苷;

2.XFZYD 可減輕創(chuàng)傷性腦損傷（TBI）小鼠的神經(jīng)功能缺損及腦損傷。

3.XFZYD 通過調(diào)節(jié)小膠質(zhì)細(xì)胞活化并促進(jìn)抗炎作用，從而改善創(chuàng)傷性腦損傷（TBI）中的神經(jīng)元微環(huán)境。

4.XFZYD 上調(diào)tRF-3-Leu- AAG 的表達(dá)水平。

5.tRF-3-Leu-AAG能夠抑制神經(jīng)炎癥反應(yīng)。

6.XFZYD 靶向tRF-3-Leu- AAG 以抑制炎癥反應(yīng)。

7.體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明， XFZYD 可通過調(diào)節(jié)tRF-3-Leu- AAG 來緩解神經(jīng)炎癥。

8.XFZYD 調(diào)控的tRF-3-Leu- AAG 靶向Gpr17以抑制神經(jīng)炎癥反應(yīng)。

【結(jié)論與討論】

總之，本研究闡明了tRF-3-Leu-AAG/Gpr17軸是XFZYD促進(jìn)TBI恢復(fù)的關(guān)鍵機(jī)制途徑。tRF-3-Leu-AAG的特異性上調(diào)，再加上隨后Gpr17的下調(diào)，是觀察到的神經(jīng)炎癥減少和神經(jīng)功能改善不可或缺的一部分。這些發(fā)現(xiàn)為XFZYD的治療應(yīng)用提供了直接的分子基礎(chǔ)，并將這一新特征軸定位為有前景的靶點(diǎn)。

注：本文原創(chuàng)表明為原創(chuàng)編譯，非聲張版權(quán)，侵刪！

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