復方1區if7+: 廣州中醫藥大學等揭示息風止抽湯通過調節神經炎癥和神經遞質穩態緩解抽動障礙

【寫在前面】：本期推薦的是由廣州中醫藥大學第二臨床學院、深圳市兒童醫院等研究團隊合作近期發表于Chinese Medicine(IF7.4）的一篇文章，揭示清息風止抽湯通過調節神經炎癥和神經遞質穩態緩解幼年大鼠抽動障礙：Nr4a2和腸道微生物群的雙重調節。

【期刊簡介】

【題目及作者信息】

Xifeng Zhichou decoction mitigates tic disorder on juvenile rats by regulating neuroinflammation and neurotransmitter homeostasis: dual modulation of Nr4a2 and gut microbiota

背景

息風止抽湯是一種改良的中藥制劑，在治療抽動障礙（TD）方面顯示出顯著的臨床療效。然而，其療效和治療機制仍不夠明確。

目的

本研究旨在全面評估XFZCD在大鼠模型中的抗TD作用，并闡明其潛在機制。

方法

超高效液相色譜-質譜（UPLC-MS）用于XFZCD的質量分析，而網絡藥理學用于預測核心化合物和潛在機制。通過腹腔注射3,3-亞氨基二丙腈建立幼年TD大鼠模型，并使用行為測試、細胞因子測定和免疫組織化學評估XFZCD的治療效果。通過研究調控基因和腸腦軸，采用轉錄組學和16S rRNA測序來闡明其機制。Western blot（WB）和酶聯免疫吸附試驗用于聚焦和驗證潛在機制。非靶向代謝組學從末端代謝物的角度確認了關鍵途徑。此外，在脂多糖（LPS）攻擊的SH-SY5Y細胞中進行了Nr4a靶向siRNA敲除，以驗證Nr4a2在XFZCD介導的神經保護中的核心調節作用。

結果

UPLC-MS分析鑒定了XFZCD中的66種化合物。網絡藥理學在富集分析中強調了5-羥色胺能和多巴胺能突觸以及JAK-STAT信號，表明XFZCD通過調節神經炎癥和神經遞質穩態來治療TD。XFZCD顯著減輕了大鼠模型中的抽搐、異常運動行為和厭食癥，同時也減輕了紋狀體神經炎癥和氧化應激，從而對TD表現出顯著的治療作用。轉錄組學分析確定Nr4a2是一個關鍵的調控基因，它與通過網絡藥理學鑒定的核心成分表現出很強的結合親和力。16S rRNA測序顯示，XFZCD通過恢復厚壁菌門/擬桿菌門的比例來調節腸道功能。WB和ELISA實驗證實，XFZCD可以抑制炎癥反應，恢復中樞神經遞質穩態。非靶向代謝組學表明，XFZCD逆轉TD導致膽汁酸代謝異常，這與腸道微生物重塑密切相關。細胞實驗證實，Nr4a2沉默在很大程度上消除了XFZCD對神經炎癥的抑制作用及其對神經遞質平衡的調節功能。

結論

XFZCD通過Nr4a2和腸道菌群的雙重調節抑制炎癥和平衡神經遞質，在治療TD方面顯示出顯著療效。值得注意的是，Nr4a2和膽汁酸代謝的調節成為治療TD的有前景的治療途徑。

圖文摘要

【前言】

抽搐障礙（TD）是一種復雜的神經發育障礙，在兒童中非常普遍。中國的一項全國流行病學調查顯示，6-16歲學齡兒童和青少年中TD的患病率為2.46%。TD患者經常出現突然、快速、重復和有節奏的運動抽搐和/或聲音抽搐，這會導致學業、社會和精神問題，嚴重影響兒童及其家庭的生活質量。目前，用于TD臨床治療的α2-腎上腺素能激動劑和抗精神病藥物因其副作用如體重增加、嗜睡、錐體外系癥狀和代謝異常而在臨床應用中受到限制。因此，迫切需要開發安全有效的TD藥物治療方法。

根據中醫理論，TD的發病機制與肝風內蘊有著錯綜復雜的聯系。鎮靜肝臟以祛風的治療策略顯示出有希望的臨床效果，報告的不良反應很少。XFZCD是深圳兒童醫院通過廣泛的臨床實踐開發的經典中藥方劑的獨特配方。臨床上，它已被證明在降低TD兒童抽搐頻率和改善相關指標方面具有強大的臨床療效，包括耶魯全球抽搐嚴重程度量表（YGTSS）評分。然而，系統研究的不足和機制的不明確阻礙了其標準化發展和更廣泛的臨床應用。

在這項研究中，使用UPLC-MS對XFZCD的成分進行了定性分析，以說明化學成分，并進行了網絡藥理學研究，以預測核心成分和多靶點治療特征。采用幼年大鼠建立TD模型，模擬TD兒童的臨床特征。通過行為表現、神經炎癥、氧化應激和小膠質細胞活化系統地評估了XFZCD的效果。使用轉錄組學和16S rRNA測序探索了機制見解，重點關注調控基因和腸腦軸。進行了進一步的研究，包括代謝組學、ELISA、WB和LPS刺激的SH-SY5Y細胞中siRNA介導的Nr4a2敲除，以驗證分子機制。本研究提供了將Nr4a2和腸道微生物群調節與TD中的神經炎癥和神經遞質調節聯系起來的機制證據，從而支持XFZCD作為TD的有前景的多靶點治療候選者。

【結果部分】

1.XFZCD 的化學表征與網絡藥理學分析。

2.XFZCD 對TD大鼠抽動樣行為、神經炎癥、氧化應激及小膠質細胞活化的影響。

3.對TD大鼠（n=3）紋狀體組織進行的轉錄組分析。

4.腸道微生物群的16S rRNA基因測序分析（n=6）。

5.驗證 XFZCD 對TD大鼠膽汁酸代謝、神經遞質穩態及Nr4a2信號通路的影響。

6.敲低Nr4a2基因可減弱含 XFZCD 血清在LPS刺激的SH-SY5Y細胞中的抗炎作用。

7.XFZCD 治療TD的作用機制示意圖。

【結論與討論】

本研究證實， XFZCD 在緩解TD癥狀方面具有顯著的治療效果。其作用機制與神經炎癥及神經遞質平衡的調節密切相關，而這兩者均受Nr4a2和腸道微生物群的共同調控。值得注意的是，Nr4a2在抑制炎癥反應和增強多巴胺能活性方面的雙重調節功能，凸顯了其作為治療TD的潛在靶點價值（圖7）。

注：本文原創表明為原創編譯，非聲張版權，侵刪！

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