Phytomedicine：黃連溫膽湯通過腸-腦軸PPAR-α/別孕烯醇酮通路改善抑郁

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寫在前面

抑郁癥是全球致殘率最高的精神疾病之一，與炎癥、腸道屏障受損和神經(jīng)可塑性下降密切相關(guān)。

近日，一篇發(fā)表于 Phytomedicine（IF:11.3） 的研究揭示：經(jīng)典清熱化痰方黃連溫膽湯（HLWD）可通過上調(diào)結(jié)腸PPAR-α表達(dá)，促進(jìn)別孕烯醇酮（allopregnanolone）合成并進(jìn)入外周循環(huán)，進(jìn)而改善海馬神經(jīng)炎癥、增強(qiáng)神經(jīng)發(fā)生和突觸功能，最終緩解慢性社交挫敗應(yīng)激（CSDS）誘導(dǎo)的抑郁樣行為。

昨天（2026年6月17日），Web of Science平臺發(fā)布了2025年度《期刊引證報告》，不少期刊的影響因子發(fā)生了變化，其中 phytomedicine影響因子從8.3漲到11.3； Journal of Ethnopharmacology從5.4分漲到6.8分，Chinese Medicine也漲到了7.4分。需要完整的報告表可以添加下方小編的微信獲取，也可點擊該鏈接查看

題目及作者信息

文獻(xiàn)概述：一張圖讀懂核心發(fā)現(xiàn)

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研究背景

抑郁癥負(fù)擔(dān)沉重：全球抑郁癥患病率持續(xù)上升，現(xiàn)有抗抑郁藥（如SSRIs）存在起效慢、有效率有限、副作用多等問題。

腸-腦軸是抑郁癥的重要機(jī)制：腸道屏障受損可導(dǎo)致內(nèi)毒素入血，激活全身性炎癥反應(yīng)，進(jìn)而影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)，驅(qū)動抑郁發(fā)生。炎癥與抑郁形成惡性循環(huán)。

PPAR-α是調(diào)控炎癥和神經(jīng)甾體合成的關(guān)鍵核受體：PPAR-α激活可促進(jìn)別孕烯醇酮（一種內(nèi)源性“鎮(zhèn)靜劑”和抗炎神經(jīng)甾體）的合成。別孕烯醇酮通過正變構(gòu)調(diào)節(jié)GABA-A受體發(fā)揮抗焦慮和抗抑郁作用，其外周和腦脊液水平在抑郁癥患者中降低。

黃連溫膽湯傳統(tǒng)用于痰熱內(nèi)擾所致的精神情志疾病，現(xiàn)代臨床顯示對抑郁、失眠有效，可調(diào)節(jié)炎癥和腸道屏障，但其具體作用機(jī)制尚未闡明。

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研究思路

1. 成分分析
   UPLC：正負(fù)離子模式下鑒定黃連溫膽湯中42種成分，主要為黃酮類、生物堿類和香豆素類。

2. 動物實驗
   模型：C57BL/6J雄性小鼠，慢性社交挫敗應(yīng)激（CSDS）模型——每日與攻擊性ICR小鼠直接對抗5-10分鐘，隨后24小時感官接觸，持續(xù)14天。分組：對照組、CSDS模型組、艾司西酞普蘭陽性藥組（1.3 mg/kg）、黃連溫膽湯低劑量組（3.51 g/kg）、中劑量組（7.02 g/kg）、高劑量組（14.04 g/kg），每組12只。灌胃2周。PPAR-α拮抗劑挽救實驗：GW6471（2.5 mg/kg/d，腹腔注射，給藥前15分鐘），驗證PPAR-α在黃連溫膽湯效應(yīng)中的必要性。抗生素清除菌群實驗：驗證黃連溫膽湯療效是否依賴腸道菌群。行為學(xué)：SPT（快感缺失）、TST（行為絕望）、OFT（自主活動/焦慮）、SIT（社交回避）。組織病理：結(jié)腸H&E、PAS（黏液）、AB（杯狀細(xì)胞）染色。炎癥因子：ELISA檢測結(jié)腸和海馬IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-4、IL-10。神經(jīng)可塑性：免疫熒光檢測海馬DCX（神經(jīng)發(fā)生）和IBA1（小膠質(zhì)細(xì)胞活化）；Western blot檢測PSD-95和α-突觸核蛋白（突觸功能）。腸屏障：免疫熒光和Western blot檢測結(jié)腸ZO-1和Occludin。PPAR-α/別孕烯醇酮軸：Western blot檢測結(jié)腸和海馬PPAR-α；ELISA檢測血清、結(jié)腸、海馬、皮層、伏隔核別孕烯醇酮水平。TLR4/MyD88/NF-κB炎癥通路：Western blot檢測海馬TLR4、MyD88、p-NF-κB/NF-κB。

3. 轉(zhuǎn)錄組學(xué)
   結(jié)腸組織RNA-seq，分析差異基因，GO和KEGG富集。

4. 腸道菌群16S rRNA測序
   糞便樣本，PCA分析菌群結(jié)構(gòu)變化。

5. 分子對接與微量熱泳動（MST）

黃連溫膽湯42種成分與PPAR-α進(jìn)行分子對接，MST驗證高親和力成分與PPAR-α的直接結(jié)合。

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創(chuàng)新性

• 機(jī)制創(chuàng)新：首次揭示黃連溫膽湯通過“結(jié)腸PPAR-α/別孕烯醇酮”軸發(fā)揮抗抑郁作用，將腸道核受體、神經(jīng)甾體與大腦功能連接起來。

• 腸-腦軸新視角：不同于常見的“腸道菌群-代謝物”機(jī)制，本研究聚焦于腸道自身作為內(nèi)分泌器官——通過上調(diào)結(jié)腸PPAR-α促進(jìn)神經(jīng)甾體合成并釋放入血，為“腸-腦軸”提供了新的分子橋梁。

• 挽救實驗嚴(yán)謹(jǐn)：使用PPAR-α拮抗劑GW6471進(jìn)行多維度挽救（行為學(xué)、海馬炎癥/神經(jīng)發(fā)生/突觸、結(jié)腸屏障），強(qiáng)有力地證明了PPAR-α是黃連溫膽湯的關(guān)鍵靶點。

• 獨立于菌群的證據(jù)：通過16S rRNA測序和抗生素清除菌群實驗，證明黃連溫膽湯的療效不依賴于腸道菌群重塑，直指宿主自身的分子通路。

• 成分-靶點結(jié)合驗證：除了分子對接，還使用微量熱泳動（MST）技術(shù)驗證了黃連溫膽湯中活性成分與PPAR-α的直接結(jié)合，比單純的in silico預(yù)測更具說服力。

• 多組織檢測：同時檢測了結(jié)腸、血清、海馬、皮層、伏隔核的別孕烯醇酮水平，清晰揭示了“結(jié)腸合成→外周循環(huán)→海馬作用”的路徑。

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研究結(jié)果

圖1：黃連溫膽湯UPLC總離子流圖

這張圖展示了黃連溫膽湯的化學(xué)成分鑒定。在正離子（A）和負(fù)離子（B）模式下獲得總離子流圖，共鑒定出42種成分，主要包括黃酮類、生物堿類和香豆素類（具體列表見表3、表4）。這為后續(xù)機(jī)制研究和分子對接提供了物質(zhì)基礎(chǔ)。

圖2：黃連溫膽湯改善CSDS小鼠的抑郁樣行為

這張圖展示了黃連溫膽湯的整體藥效。(A) 實驗流程圖：CSDS造模14天，隨后灌胃給藥2周，再進(jìn)行行為學(xué)測試。(B) SPT：CSDS組蔗糖偏好顯著降低（快感缺失），黃連溫膽湯高劑量組和艾司西酞普蘭組恢復(fù)。(C) TST：CSDS組不動時間顯著延長（行為絕望），黃連溫膽湯組縮短。(D) OFT和SIT的代表性熱圖和運動軌跡：模型組活動減少、社交回避；黃連溫膽湯組改善。(E-F) OFT：各組總運動距離無顯著差異（排除運動能力影響），模型組中央?yún)^(qū)時間減少，黃連溫膽湯組恢復(fù)。(G-H) SIT：模型組社交評分和社交區(qū)時間顯著降低，黃連溫膽湯組恢復(fù)。這表明黃連溫膽湯可有效改善CSDS誘導(dǎo)的快感缺失、行為絕望和社交回避。

圖3：黃連溫膽湯改善CSDS小鼠的神經(jīng)發(fā)生和突觸功能

這張圖展示了黃連溫膽湯對海馬的作用。(A-D) ELISA：模型組海馬促炎因子IL-1β、TNF-α升高，抗炎因子IL-10、IL-4降低；黃連溫膽湯逆轉(zhuǎn)。(E-G) Western blot：模型組突觸蛋白PSD-95和α-突觸核蛋白表達(dá)降低；黃連溫膽湯恢復(fù)。(H) 機(jī)制示意圖。(I-K) IBA1免疫熒光：模型組IBA1?小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量增加、分支減少（活化狀態(tài)）；黃連溫膽湯抑制小膠質(zhì)細(xì)胞活化，增加分支復(fù)雜性。(L-N) DCX免疫熒光：模型組海馬DCX?神經(jīng)發(fā)生減少；黃連溫膽湯增強(qiáng)神經(jīng)發(fā)生。這表明黃連溫膽湯通過抑制神經(jīng)炎癥、增強(qiáng)突觸功能和神經(jīng)發(fā)生來發(fā)揮抗抑郁作用。

圖4：黃連溫膽湯保護(hù)CSDS小鼠的腸道黏膜屏障

這張圖展示了黃連溫膽湯對結(jié)腸屏障的保護(hù)作用。(A) H&E、PAS、AB染色：CSDS組結(jié)腸黏膜炎性細(xì)胞浸潤、杯狀細(xì)胞減少、黏液層變薄和中斷；黃連溫膽湯組改善。(B-D) 定量分析：病理評分在CSDS組升高，黃連溫膽湯組降低；PAS?和AB?細(xì)胞在CSDS組減少，黃連溫膽湯組恢復(fù)。(E-J) ELISA：CSDS組結(jié)腸促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α升高，抗炎因子IL-10、IL-4降低；黃連溫膽湯逆轉(zhuǎn)。(K-M) 免疫熒光：CSDS組緊密連接蛋白Occludin和ZO-1熒光強(qiáng)度降低；黃連溫膽湯恢復(fù)。(N-P) Western blot驗證Occludin和ZO-1蛋白表達(dá)。這表明黃連溫膽湯可修復(fù)CSDS誘導(dǎo)的腸道屏障損傷和炎癥。

圖5：結(jié)腸轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析

這張圖揭示了黃連溫膽湯對結(jié)腸基因表達(dá)的影響。(A) Venn圖：模型組vs對照組230個差異基因，黃連溫膽湯高劑量組vs模型組6944個差異基因，共同差異171個。(B) PCA：對照組、模型組、黃連溫膽湯組三組樣本分離明顯。(C-D) GO富集分析（BP、CC、MF）。(E-F) KEGG富集分析：差異基因富集于代謝調(diào)控、神經(jīng)功能、神經(jīng)信號、內(nèi)分泌/激素調(diào)控等通路。其中PPAR信號通路的富集尤為顯著，提示PPAR在抑郁癥及其改善中發(fā)揮重要作用。

圖6：黃連溫膽湯促進(jìn)PPAR-α和別孕烯醇酮表達(dá)

這張圖是核心機(jī)制驗證。(A-B) Western blot：CSDS組結(jié)腸PPAR-α蛋白降低，黃連溫膽湯組恢復(fù)。(C) qPCR：CSDS組結(jié)腸PPAR-α mRNA降低，黃連溫膽湯組升高。(D-H) ELISA檢測別孕烯醇酮：CSDS組血清、結(jié)腸、海馬、皮層、伏隔核中別孕烯醇酮水平均降低；黃連溫膽湯組在結(jié)腸、血清、海馬中顯著升高（皮層和伏隔核無顯著變化）。(I-N) 海馬Western blot：CSDS組PPAR-α降低，TLR4、MyD88、p-NF-κB/NF-κB升高；黃連溫膽湯組恢復(fù)。值得注意的是，黃連溫膽湯對海馬PPAR-α無直接調(diào)節(jié)作用，提示別孕烯醇酮是從外周進(jìn)入海馬的。這證實黃連溫膽湯通過上調(diào)結(jié)腸PPAR-α，增加別孕烯醇酮合成并釋放入血，進(jìn)而進(jìn)入海馬發(fā)揮抗炎作用。

圖7：PPAR-α拮抗劑GW6471逆轉(zhuǎn)黃連溫膽湯的抗抑郁效果

這張圖通過挽救實驗驗證了PPAR-α的必要性。(A) 實驗流程圖：在黃連溫膽湯給藥前15分鐘腹腔注射GW6471（PPAR-α拮抗劑）。(B) SIT：黃連溫膽湯增加社交區(qū)時間，GW6471逆轉(zhuǎn)。(C) OFT和SIT代表性熱圖和軌跡：GW6471逆轉(zhuǎn)了黃連溫膽湯的改善效果。(D) 社交評分：GW6471逆轉(zhuǎn)。(E) OFT中央?yún)^(qū)時間：GW6471逆轉(zhuǎn)。(F) TST不動時間：GW6471逆轉(zhuǎn)。(G) SPT蔗糖偏好：GW6471逆轉(zhuǎn)。這直接證明黃連溫膽湯的抗抑郁效果依賴于PPAR-α的激活。

圖8：PPAR-α拮抗劑GW6471逆轉(zhuǎn)黃連溫膽湯對海馬炎癥和神經(jīng)發(fā)生的影響

這張圖展示了GW6471對海馬分子指標(biāo)的逆轉(zhuǎn)作用。(A-C) Western blot：GW6471逆轉(zhuǎn)了黃連溫膽湯對海馬PPAR-α的上調(diào)和對TLR4、MyD88、p-NF-κB的抑制。(D) ELISA：GW6471逆轉(zhuǎn)了黃連溫膽湯對海馬IL-1β的降低和對IL-10的升高。(E-G) IBA1免疫熒光：GW6471逆轉(zhuǎn)了黃連溫膽湯對小膠質(zhì)細(xì)胞活化的抑制。(H-J) DCX免疫熒光：GW6471逆轉(zhuǎn)了黃連溫膽湯對神經(jīng)發(fā)生的增強(qiáng)。(K-M) Western blot：GW6471逆轉(zhuǎn)了黃連溫膽湯對PSD-95和α-突觸核蛋白的恢復(fù)。這進(jìn)一步證實PPAR-α是黃連溫膽湯抗抑郁機(jī)制中的關(guān)鍵靶點。

圖9：PPAR-α拮抗劑GW6471逆轉(zhuǎn)黃連溫膽湯對結(jié)腸屏障的保護(hù)作用

這張圖展示了GW6471對結(jié)腸指標(biāo)的逆轉(zhuǎn)作用。(A-C) 免疫熒光：GW6471逆轉(zhuǎn)了黃連溫膽湯對Occludin和ZO-1的上調(diào)。(D-F) Western blot驗證。(G) H&E、PAS、AB染色：GW6471逆轉(zhuǎn)了黃連溫膽湯對結(jié)腸病理的改善。(H-J) 定量分析：GW6471逆轉(zhuǎn)了病理評分的降低和PAS?/AB?細(xì)胞的恢復(fù)。這證明黃連溫膽湯對腸道屏障的保護(hù)作用同樣依賴于PPAR-α。

圖10：機(jī)制示意圖

這張圖總結(jié)了全文的機(jī)制。CSDS應(yīng)激導(dǎo)致結(jié)腸PPAR-α表達(dá)下調(diào)，別孕烯醇酮合成減少，腸道屏障受損，內(nèi)毒素入血觸發(fā)TLR4/MyD88/NF-κB炎癥通路，進(jìn)而引發(fā)海馬神經(jīng)炎癥、小膠質(zhì)細(xì)胞活化、神經(jīng)發(fā)生減少和突觸功能障礙，最終導(dǎo)致抑郁樣行為。黃連溫膽湯通過上調(diào)結(jié)腸PPAR-α，促進(jìn)別孕烯醇酮合成并釋放入血，進(jìn)入海馬后抑制炎癥通路，恢復(fù)神經(jīng)發(fā)生和突觸功能，同時修復(fù)腸道屏障，從而打破“腸-炎癥-腦”的惡性循環(huán)，改善抑郁。

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結(jié)語

這項研究首次揭示了黃連溫膽湯通過“結(jié)腸PPAR-α → 別孕烯醇酮 → 外周循環(huán) → 海馬抗炎/神經(jīng)保護(hù)”的腸-腦軸新機(jī)制發(fā)揮抗抑郁作用，為經(jīng)典清熱化痰方治療抑郁癥提供了現(xiàn)代科學(xué)解釋。

尤為值得關(guān)注的是，黃連溫膽湯的療效不依賴于腸道菌群重塑，而是通過直接作用于結(jié)腸PPAR-α，促進(jìn)內(nèi)源性“鎮(zhèn)靜劑”別孕烯醇酮的合成與釋放。這一發(fā)現(xiàn)不僅深化了對“腸-腦軸”分子機(jī)制的理解，也為開發(fā)靶向腸道核受體的新型抗抑郁藥物提供了新思路。期待未來有更多高質(zhì)量的轉(zhuǎn)化研究，推動黃連溫膽湯在抑郁癥治療中的精準(zhǔn)應(yīng)用！

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參考文獻(xiàn)

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