復方top-6.8分: 中國藥科大學團隊揭示芎芷祛風止痛顆粒通過HMGB1/TRPV1/MAPK信號軸緩解慢性偏頭痛樣疼痛和中樞神經炎癥

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寫在前面

慢性偏頭痛是一種高度致殘的神經系統疾病，全球數億人受困于此。現有治療藥物療效有限且副作用顯著，長期用藥依從性差。近日，一篇發表于Journal of Ethnopharmacology（2區TOP，6.8分）的研究揭示：源于國醫大師臨床經驗的芎芷祛風止痛顆粒（XZQF），可通過調控HMGB1/TRPV1/MAPK信號軸，顯著減輕硝酸甘油誘導的慢性偏頭痛樣疼痛和中樞神經炎癥，且安全性良好，為偏頭痛治療提供了新的候選藥物。

文獻概述：一張圖讀懂核心發現

芎芷祛風止痛顆粒可劑量依賴性提高機械痛閾、延長甩尾潛伏期、減少偏頭痛樣行為，改善TNC腦組織病理損傷。網絡藥理學預測核心成分為洋川芎內酯E/F、阿魏酸、新蛇床內酯、甲基丁香酚等，核心靶點為STAT3、NFKB1、JUN、PTGS2、IL1B等，富集于MAPK、PI3K-Akt、cAMP等通路。實驗驗證表明，芎芷祛風止痛顆粒顯著抑制CGRP、TRPV1、c-Fos、COX-2、HMGB1蛋白表達及MEK/MAPK磷酸化

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研究背景

慢性偏頭痛負擔沉重：每月頭痛發作≥15天、持續≥3個月，發病率逐年上升，嚴重影響生活質量，給家庭和社會帶來巨大經濟負擔。

現有藥物局限明顯：非特異性鎮痛藥和曲普坦類藥物療效有限、副作用多（如藥物過度使用性頭痛、心血管風險），長期用藥依從性差，亟需更安全有效的新藥。

HMGB1/TRPV1/MAPK通路是偏頭痛的關鍵機制：

• HMGB1是一種損傷相關分子模式（DAMPs），在細胞應激或損傷時釋放至胞外，激活TLR/RAGE受體，啟動神經炎癥級聯反應。HMGB1已被證明在皮層擴散性抑制（CSD）后釋放，驅動腦膜神經源性炎癥。

• TRPV1是痛覺傳導的關鍵離子通道，在三叉神經纖維中高表達，激活后促進CGRP和P物質釋放，介導神經源性炎癥和中樞敏化。HMGB1與TRPV1之間存在正反饋環：TRPV1激活可促進HMGB1釋放，HMGB1又可上調TRPV1表達。

• MAPK通路是TRPV1下游的重要信號樞紐，磷酸化后促進炎癥因子和CGRP的產生，加劇中樞敏化和異常疼痛。

芎芷祛風止痛顆粒（XZQF）源于國醫大師臨床經驗，在中醫“頭風”理論指導下組方，具有明確的臨床療效基礎，但其作用機制尚未被系統闡明。

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研究思路

1. 質量標準建立
   HPLC：建立XZQF指紋圖譜，確定11個特征峰，以阿魏酸為參照峰（S峰），四批樣品一致性良好（圖1）。

2. 動物實驗

模型：SD大鼠（雌雄各半），NTG（10 mg/kg）隔日腹腔注射，共5次，建立慢性偏頭痛模型。

分組（n=10/組）：對照組、模型組、XZQF低劑量組（1.4397 g/kg）、中劑量組（2.8793 g/kg）、高劑量組（5.7586 g/kg）、正天丸組（ZTW，1.8510 g/kg，陽性對照中成藥）、布洛芬組（0.0823 g/kg，陽性對照西藥）。灌胃21天，第6天起隔日注射NTG。

檢測指標：

• 行為學：Von Frey測足底和眶周痛閾、甩尾潛伏期（TFL）、偏頭痛樣行為評分（抓頭、爬壁、轉圈、咬尾、來回踱步）。

• 器官系數：心、肝、脾、肺、腎、腦、胸腺系數。

• 組織病理：TNC腦組織HE染色。

• ELISA：血清和TNC組織IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10、PGE2、β-EP、5-HT、CGRP、VIP、iNOS、NO。

• 免疫熒光：TNC組織CGRP、TRPV1。

• 免疫組化：TNC組織COX-2、c-Fos、5-HT1B、HMGB1。

• Western blot：HMGB1、COX-2、CGRP、TRPV1、c-Fos、cAMP、p-MEK/MEK、p-MAPK/MAPK。

1. 網絡藥理學

TCMSP + Herb數據庫篩選XZQF活性成分（OB≥30%，DL≥0.18，BBB≥-0.3，Lipinski規則）；SwissTargetPrediction預測靶點；GeneCards/OMIM/DrugBank獲取慢性偏頭痛靶點；Venn圖獲得交集靶點；STRING構建PPI網絡；Cytoscape構建“成分-靶點”網絡；GO/KEGG富集分析；分子對接驗證關鍵成分與核心靶點結合。

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創新性

• 源自臨床的轉化研究：XZQF源于國醫大師盧芳教授的臨床經驗方，已有多年臨床應用基礎，本研究為其提供了系統的現代藥理機制證據。

• 全面的藥效評價：從行為學（痛閾、偏頭痛樣行為）→組織病理→多靶點分子標志物（炎癥/疼痛/血管）→通路蛋白，形成了完整的藥效-機制證據鏈。

• 先進的機制探索策略：網絡藥理預測 + 分子對接驗證 + 多組學分子實驗（IF、IHC、WB）三結合，高效鎖定HMGB1/TRPV1/MAPK為核心通路。

• 嚴格的對照設計：同時設置中成藥陽性對照（正天丸，臨床常用藥）和西藥陽性對照（布洛芬，一線用藥），全面比較XZQF的療效優勢和機制差異。

• HMGB1/TRPV1/MAPK通路創新：首次將HMGB1- TRPV1-MAPK三者作為統一的信號軸進行系統性研究，揭示了HMGB1作為偏頭痛上游炎癥警報素的角色和TRPV1作為下游關鍵節點的作用。

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研究結果

圖1：芎芷祛風止痛顆粒（XZQF）的HPLC指紋圖譜

這張圖展示了XZQF的質量標準。(A) 標準圖譜：11個特征峰，峰8為阿魏酸參照峰（S）。(B) 四批樣品（S1-S4）色譜圖與標準圖譜高度一致，說明XZQF質量穩定可控，批次間一致性良好。峰3鑒定為葛根素，峰10為羥基胡薄荷酮。

圖2：XZQF對NTG誘導的慢性偏頭痛大鼠體重、攝食量及器官系數的影響

這張圖展示了XZQF的安全性。(A) 實驗流程圖。(B-D) 各組間體重、進食量、飲水量無顯著差異。(E-K) 心、肝、脾、肺、腎、腦、胸腺系數各組間無顯著差異。說明XZQF在治療劑量下對主要臟器無明顯毒性。

圖3：XZQF改善NTG誘導的慢性偏頭痛大鼠的痛閾和偏頭痛樣行為

這張圖展示了XZQF的鎮痛和行為改善效果。(A) 足底痛閾：模型組顯著降低（機械異常性疼痛），XZQF劑量依賴性升高。(B) 眶周痛閾：模型組降低（眶周皮膚異常性疼痛，偏頭痛特征表現），XZQF升高。(C) 甩尾潛伏期（TFL）：模型組縮短（痛敏），XZQF延長。(D-J) 偏頭痛樣行為評分（抓頭、爬壁等）：NTG注射后模型組評分顯著升高，XZQF在第6、9、12、15、17、21天均可降低行為評分，且效果優于正天丸和布洛芬。這表明XZQF可有效緩解慢性偏頭痛的中樞和外周痛敏及行為異常。

圖4：XZQF改善NTG誘導的慢性偏頭痛大鼠TNC腦組織的病理損傷

這張圖展示了XZQF對腦組織的保護作用。(A-G) HE染色代表性圖片：對照組神經元排列整齊、邊界清晰；模型組神經元數量減少、炎性細胞浸潤、細胞腫脹紊亂、空泡化；XZQF低、中、高劑量組炎性浸潤減輕、纖維化減少、空泡減少，高劑量組最顯著。正天丸和布洛芬也有改善，但XZQF效果更優。(H) 病理評分：模型組升高，XZQF組降低。這證明XZQF可減輕慢性偏頭痛誘導的TNC腦組織損傷。

圖5和圖6：XZQF調節NTG誘導的慢性偏頭痛大鼠血清和TNC組織的炎癥因子、疼痛介質和血管活性物質

這兩張圖展示了XZQF對分子標志物的系統調節。模型組血清和TNC組織中促炎因子（IL-1β、IL-6、TNF-α）和疼痛介質（PGE2）升高，抗炎因子（IL-10）和鎮痛介質（β-EP、5-HT）降低；血管活性物質（CGRP、VIP、iNOS、NO）升高。XZQF劑量依賴性逆轉這些變化——降低促炎因子、PGE2、CGRP、VIP、iNOS、NO，升高IL-10、β-EP、5-HT。正天丸和布洛芬也有改善，但XZQF在β-EP、5-HT和CGRP調節上優于兩者。這表明XZQF通過多靶點調節炎癥、疼痛和血管功能發揮抗偏頭痛作用。

圖7和圖8：網絡藥理學預測XZQF抗慢性偏頭痛的靶點和通路

這兩張圖展示了網絡藥理學預測結果。(圖7A) 從GeneCards、OMIM、DrugBank獲得3711個慢性偏頭痛靶點。(圖7B) XZQF活性成分靶點與CM疾病靶點交集獲得422個共同靶點。(圖7C) PPI網絡篩選出核心靶點：STAT3、BCL2、JUN、MMP9、NFKB1、CASP3等。分析顯示XZQF預測的核心成分包括洋川芎內酯E/F、阿魏酸、新蛇床內酯、甲基丁香酚等。(圖8A-C) GO富集顯示生物過程涉及信號轉導、轉錄調控、G蛋白偶聯受體信號、炎癥反應等；細胞組分主要為質膜、胞質、細胞核；分子功能主要為蛋白結合、ATP結合、蛋白激酶活性。(圖8D) KEGG富集顯示癌癥通路、神經活性配體-受體互作、鈣信號、PI3K-Akt、MAPK、cAMP等通路顯著富集。這些結果預測XZQF通過多靶點調控炎癥和疼痛相關通路。

圖9：關鍵成分與核心靶點的分子對接

這張圖驗證了活性成分與靶點的結合能力。洋川芎內酯E、洋川芎內酯F、阿魏酸、新蛇床內酯、甲基丁香酚與c-Fos、CGRP、HMGB1、PTGS2（COX-2）、TRPV1均表現出強結合活性（結合能<-5.0 kcal/mol，多數<-7.0 kcal/mol）。這為XZQF中這些成分作為核心活性物質提供了結構依據。

圖10：免疫熒光檢測XZQF對TNC組織中CGRP和TRPV1蛋白表達的影響

這張圖展示了XZQF對三叉神經痛覺通路關鍵分子的抑制作用。(A) CGRP免疫熒光：模型組TNC組織CGRP熒光強度顯著增強，XZQF各劑量組劑量依賴性降低，高劑量效果接近正天丸且優于布洛芬。(B) TRPV1免疫熒光：模型組TRPV1熒光強度增強，XZQF顯著降低，效果優于正天丸和布洛芬。這表明XZQF可有效抑制三叉神經系統中CGRP和TRPV1的異常表達，阻斷疼痛信號的傳導和放大。

圖11：免疫組化檢測XZQF對TNC組織中COX-2、c-Fos、5-HT1B和HMGB1蛋白表達的影響

這張圖展示了XZQF對炎癥、疼痛和HMGB1信號的關鍵分子調控。(A) COX-2：模型組升高（前列腺素合成關鍵酶），XZQF降低。(B) c-Fos：模型組升高（神經元激活標志物），XZQF降低。(C) 5-HT1B：模型組降低（5-HT1B是抑制性受體，其下調與偏頭痛相關），XZQF升高（恢復）。(D) HMGB1：模型組升高（炎癥警報素釋放），XZQF降低。正天丸和布洛芬也改善這些指標，但XZQF表現更全面。這證明XZQF通過抑制HMGB1釋放、COX-2/PGE2合成和神經元激活，恢復5-HT1B受體表達來綜合干預偏頭痛病理。

圖12：Western blot檢測XZQF對TNC組織HMGB1/TRPV1/MAPK通路蛋白的影響

這張圖是機制驗證的核心。(A-I) 模型組HMGB1、COX-2、CGRP、TRPV1、c-Fos、cAMP、p-MEK/MEK、p-MAPK/MAPK蛋白表達均顯著升高；XZQF劑量依賴性降低上述蛋白表達。正天丸可降低HMGB1、COX-2、CGRP、c-Fos、p-MAPK，但對TRPV1、cAMP、p-MEK無顯著作用；布洛芬可降低HMGB1、COX-2、TRPV1、c-Fos、cAMP、p-MEK、p-MAPK，但對CGRP無顯著作用。相比之下，XZQF對所有檢測靶點均表現出顯著抑制作用，效果更為全面。這證實XZQF通過抑制HMGB1/TRPV1/MAPK信號軸發揮抗慢性偏頭痛作用，且比單一靶點藥物更具優勢。

圖13：機制示意圖

這張圖總結了全文機制。NTG誘導的慢性偏頭痛激活HMGB1釋放，HMGB1與TRPV1互作激活MAPK信號通路，促進CGRP、COX-2/PGE2、c-Fos等炎癥和疼痛介質表達，導致三叉神經尾核（TNC）神經炎癥、中樞敏化和異常疼痛。XZQF通過抑制HMGB1/TRPV1/MAPK軸，阻斷這一級聯反應，減輕神經炎癥，緩解疼痛。

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結語

這項研究首次系統揭示了芎芷祛風止痛顆粒通過HMGB1/TRPV1/MAPK信號軸發揮抗慢性偏頭痛作用的完整機制鏈。從國醫大師臨床經驗方到現代機制闡釋，從網絡藥理學預測到多維度實驗驗證，本研究為中藥復方治療慢性偏頭痛提供了堅實的科學依據。

尤為值得關注的是，XZQF在抑制TRPV1和CGRP方面優于布洛芬，在調節HMGB1/TRPV1/MAPK全軸方面比正天丸更全面，提示其作為偏頭痛治療候選藥物的獨特優勢。XZQF源遠流長的臨床使用歷史和本研究的科學證據相結合，使其具有良好的臨床轉化前景。期待未來有更多的臨床試驗支持其作為新型抗慢性偏頭痛藥物的應用！

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參考文獻

Huang L, Zhou J, Han Y, Mou X, Zheng Y, Liu C, Ou Y, Ding X, Han B. Xiongzhi Qufeng Zhitong Granule alleviates nitroglycerin-induced migraine-like nociception and central neuroinflammation by regulating the HMGB1 / TRPV1 / MAPK signaling axis. J Ethnopharmacol. 2026 Jul 6;372:122147.

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