中藥復(fù)方發(fā)10分+: 山東中醫(yī)藥大學(xué)一臨學(xué)院及其附屬醫(yī)院揭示加味壽胎丸通過PPAR信號和子宮內(nèi)膜微生物群重塑促進胚胎著床機制

【寫在前面】：本期推薦的是由山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院綜合醫(yī)學(xué)生殖中心\山東中醫(yī)藥大學(xué)第一臨床學(xué)院等研究團隊合作近期發(fā)表于Phytomedicine(IF11.3）的一篇文章， 綜合多組學(xué)研究揭示加味壽胎丸通過PPAR信號傳導(dǎo)和子宮內(nèi)膜微生物群重塑促進胚胎著床。

【期刊簡介】

【題目及作者信息】

Jiawei Shoutai Pill promotes embryo implantation via PPAR signaling and endometrial microbiota remodeling: An integrative multi-omics study

背景

鑒于缺乏有效的、基于機制的干預(yù)措施來提高子宮內(nèi)膜容受性，復(fù)發(fā)性著床失敗（RIF）仍然是輔助生殖技術(shù)成功的主要障礙。加味壽胎丸（JWSTW）是生殖醫(yī)學(xué)中使用的經(jīng)典壽胎丸的改良制劑，尚未在治療RIF方面進行系統(tǒng)評估，其生物活性成分和分子靶點在很大程度上尚不清楚。

目的

確定JWSTW是否能提高植入能力，并確定與其作用相關(guān)的途徑。

材料與方法

建立米非司酮誘導(dǎo)的胚胎植入功能障礙（EID）大鼠模型，以評估植入結(jié)果、子宮組織學(xué)以及子宮內(nèi)膜容受性和血管灌注的標(biāo)志物。將大量子宮轉(zhuǎn)錄組學(xué)和外周血清非靶向代謝組學(xué)與基于液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS）的成分分析、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)、多組學(xué)相關(guān)性分析、宮腔微生物群分析和基于結(jié)構(gòu)的計算分析相結(jié)合。使用靶向分子實驗進一步評估了關(guān)鍵途徑分子。對接受輔助生殖的RIF患者進行回顧性隊列分析，以了解治療前后超聲得出的子宮內(nèi)膜容受性參數(shù)。

結(jié)果

JWSTW給藥改善了EID大鼠的植入結(jié)果，其特征是多種接受性和灌注相關(guān)組織標(biāo)志物的上調(diào)。綜合多組學(xué)分析表明，過氧化物酶體增殖物激活受體（PPAR）信號傳導(dǎo)和脂質(zhì)代謝是顯著富集的途徑，并得到了相應(yīng)基因-代謝物相關(guān)性的支持。使用PPAR激動劑（rosigitazone）和拮抗劑（T0070907）的動物實驗進一步證實，PPAR途徑是JWSTW的主要靶點。JWSTW還與子宮腔微生物群的結(jié)構(gòu)變化有關(guān)，其富集的分類群和預(yù)測的功能與脂質(zhì)代謝相關(guān)途徑一致。LC-MS/MS表征確定sweroside和loganic酸是主要的循環(huán)成分，而計算分析優(yōu)先考慮以PPAR為中心的靶網(wǎng)絡(luò)，具有良好的結(jié)合親和力和結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。在回顧性RIF隊列（n=100）中，JWSTW與子宮內(nèi)膜厚度增加和多普勒衍生灌注指數(shù)改善有關(guān)。

結(jié)論

這些結(jié)果表明，JWSTW通過調(diào)節(jié)PPAR脂質(zhì)代謝軸和重塑子宮微生物群來增強RIF中的子宮內(nèi)膜容受性并促進胚胎著床。因此，我們的研究推進了對JWSTW的藥效學(xué)理解，加深了對其在RIF中潛在機制基礎(chǔ)的理解。此外，這些發(fā)現(xiàn)提供了一種創(chuàng)新的基于中醫(yī)的治療策略，為RIF患者提供了一條有前景的治療途徑。

圖文摘要

【前言】

胚胎著床失敗仍然是自然受孕和輔助生殖早期妊娠失敗的主要原因。在自然周期中，高達30-50%的受孕在臨床識別之前終止，這通常是由于植入前后失敗造成的。即使在優(yōu)化的輔助生殖技術(shù)（ART）條件下，例如將高質(zhì)量的整倍體囊胚轉(zhuǎn)移到解剖學(xué)上正常的子宮中，植入率也很少超過50%。雖然嚴(yán)格定義的復(fù)發(fā)性著床失敗（RIF）影響的ART患者不到5%，但在臨床實踐中，這種情況往往被過度診斷。其多因素病因，包括染色體、子宮內(nèi)膜、免疫、代謝和微生物因素，限制了常規(guī)治療的有效性。盡管對RIF的認(rèn)識越來越高，但其臨床管理仍然存在差異，通常包括廣泛的測試和越來越多的實證輔助干預(yù)措施（“附加”）。支持許多附加因素的證據(jù)有限，RIF定義、患者選擇和結(jié)果指標(biāo)的異質(zhì)性進一步使跨研究的解釋復(fù)雜化。因此，最近的ESHRE良好實踐建議強調(diào)個性化、機制知情的評估，并警告在精心設(shè)計的試驗之外常規(guī)使用未經(jīng)證實的干預(yù)措施。這些挑戰(zhàn)凸顯了繼續(xù)深入研究的迫切需要，以闡明植入失敗的機制，并制定更有效的治療策略。

壽泰丸（STP）是一種經(jīng)典的中藥配方，由中國鱟、川續(xù)斷、菟絲子和鱟組成，長期以來一直被用于臨床實踐中的先兆流產(chǎn)和復(fù)發(fā)性流產(chǎn)。在中醫(yī)的框架下，腎臟控制生殖，沖任經(jīng)絡(luò)支持著床和妊娠，STP傳統(tǒng)上用于補腎、調(diào)節(jié)沖任和穩(wěn)定妊娠。復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的臨床試驗和薈萃分析表明了潛在的益處和可接受的安全性，盡管證據(jù)基礎(chǔ)是異質(zhì)的，并且主要集中在植入后的結(jié)果上。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，它在生殖系統(tǒng)疾病，特別是復(fù)發(fā)性流產(chǎn)（RPL）中具有多靶點作用。實驗?zāi)Ｐ捅砻鳎琒TP及其修飾形式可以調(diào)節(jié)宮內(nèi)微生物群膽汁酸-FXR-NLRP3炎性小體軸，并恢復(fù)糖酵解乳酸鹽-MCT4/GPR81信號傳導(dǎo)。此外，STP可以通過SGK1/ENaC途徑增強蛻膜化，通過上調(diào)TNFAIP3和抑制NF-κB活化促進母胎免疫耐受，并抑制鐵死亡以改善妊娠結(jié)局。這些研究在STP可以增強子宮內(nèi)膜功能的斷言上存在重疊。考慮到RPL發(fā)生在成功植入后，而植入失敗先于RPL，很有可能STP也可能對植入障礙具有治療潛力。然而，STP在治療植入失敗中的潛在作用，特別是其與子宮內(nèi)膜容受性和關(guān)鍵信號通路的機制聯(lián)系，尚未得到探索。

本研究旨在確定JWSTW是否改善米非司酮誘導(dǎo)的胚胎植入功能障礙（EID）大鼠模型的植入結(jié)果。加味壽胎丸（JWSTW）是一種基于實踐的STP改良劑，通過加入丹參、當(dāng)歸和香附，這是一種在臨床環(huán)境中經(jīng)常與STP一起使用的組合，用于解決與植入失敗相關(guān)的子宮組織穩(wěn)態(tài)和灌注相關(guān)特征。從中醫(yī)的角度來看，這些添加物旨在滋養(yǎng)和活血益氣，從而補充STP的補腎、穩(wěn)胎作用，并與植入障礙中常見的灌注和穩(wěn)態(tài)相關(guān)特征相一致。我們假設(shè)JWSTW調(diào)節(jié)子宮內(nèi)微生物群、代謝和母胎免疫，PPAR通路是關(guān)鍵介質(zhì)。為了解決這個問題，我們將子宮微生物群的宏基因組學(xué)、子宮內(nèi)膜轉(zhuǎn)錄組學(xué)、基于藥代動力學(xué)的代謝組學(xué)和血清代謝組學(xué)與網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和實驗驗證相結(jié)合，以闡明JWSTW的機制并確定潛在的治療靶點。

加味壽胎丸組成：

【結(jié)果部分】

1.米非司酮誘導(dǎo)的EID大鼠模型中JWSTW的實驗設(shè)計與表型評估。

2.米非司酮誘導(dǎo)的EID大鼠模型中子宮內(nèi)膜容受性相關(guān)標(biāo)志物的IHC評估。

3.大鼠經(jīng)JWSTW處理14天后子宮組織的RNA測序分析（治療EIDR）。

4.血清代謝組學(xué)研究揭示了米非司酮誘導(dǎo)的EID大鼠模型中與 JWSTW 相關(guān)的代謝重塑現(xiàn)象。

5.JWSTW的LC-MS/MS譜圖分析及網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究，將JWSTW組分與EID相關(guān)聯(lián)。

6.分子對接與分子動力學(xué)可視化。

7.在米非司酮誘導(dǎo)的Eid大鼠模型中， JWSTW 改變了子宮灌洗液中的子宮微生物群組成。

8.在米非司酮誘導(dǎo)的EID大鼠模型中， JWSTW可調(diào)控子宮內(nèi)PPAR信號通路及脂質(zhì)轉(zhuǎn)運相關(guān)基因與蛋白質(zhì)的表達。

9.在米非司酮誘導(dǎo)的EID大鼠模型中驗證JWSTW調(diào)控子宮PPAR信號通路的作用機制。

10.JWSTW治療可改善復(fù)發(fā)性流產(chǎn)后（RIF）患者的子宮灌注及子宮內(nèi)膜厚度。

【結(jié)論與討論】

本研究通過整合表型評估、多組學(xué)分析、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)及分子驗證等方法，提供了綜合性證據(jù)，表明 JWSTW 與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)（RIF）患者子宮內(nèi)膜受容性的改善相關(guān)，并提出了相應(yīng)的機制假說。在米非司酮誘導(dǎo)的EID大鼠模型中， JWSTW 與更佳的著床結(jié)局以及增強的子宮內(nèi)膜受容性相關(guān)指標(biāo)（包括子宮內(nèi)膜厚度和灌注指數(shù)）顯著相關(guān)。多層次分析一致表明，與 PPAR 相關(guān)的脂質(zhì)代謝通路是 JWSTW 治療的關(guān)鍵特征，而非以炎癥為主的信號通路。采用 PPAR 激動劑和拮抗劑進行的體內(nèi)藥理學(xué)調(diào)節(jié)實驗進一步證實了該通路與受容性表型的相關(guān)性，這與 PPAR 對JWSTW相關(guān)效應(yīng)的作用機制相符。總體而言，這些發(fā)現(xiàn)為將 JWSTW 的潛在臨床應(yīng)用范圍從復(fù)發(fā)性流產(chǎn)擴展至ART相關(guān)RIF中的著床功能障礙提供了理論依據(jù)，同時強調(diào)了開展前瞻性研究以驗證其療效、安全性和因果關(guān)系的必要性。

注：本文原創(chuàng)表明為原創(chuàng)編譯，非聲張版權(quán)，侵刪！

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