藥康生物免疫系統(tǒng)人源化小鼠：助力In vivo CAR-T研發(fā)

嵌合抗原受體T細(xì)胞（CAR-T）療法，已在血液系統(tǒng)惡性腫瘤治療中實(shí)現(xiàn)突破性進(jìn)展，但傳統(tǒng)CAR-T細(xì)胞療法流程復(fù)雜、成本高、可及性低等痛點(diǎn)，嚴(yán)重限制其臨床普及。而新一代InvivoCAR-T技術(shù)通過(guò)靶向遞送系統(tǒng)，將CAR編碼元件直接導(dǎo)入患者體內(nèi)T細(xì)胞，完成原位基因編輯與功能重塑，重構(gòu)了CAR-T的生產(chǎn)模式。這一技術(shù)革新不僅解決了傳統(tǒng)療法的固有缺陷，更拓展了CAR-T在實(shí)體瘤及自身免疫病領(lǐng)域的應(yīng)用邊界。

圖1 傳統(tǒng)CAR-T(Ex vivo CAR-T)與In vivo CAR-T(In situ CAR-T)生產(chǎn)模式對(duì)比
（圖片來(lái)源：Int J Mol Sci. 2023 Oct 28;24(21):15688.）

相較于傳統(tǒng)CAR-T療法，InvivoCAR-T療法通過(guò)T細(xì)胞趨向性慢病毒、CD8+T細(xì)胞靶向LNP等靶向遞送系統(tǒng)，將CAR編碼元件（DNA/mRNA）精準(zhǔn)遞送至患者體內(nèi)內(nèi)源性T細(xì)胞，經(jīng)載體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)導(dǎo)或胞內(nèi)釋放，完成CAR的轉(zhuǎn)錄翻譯與表面表達(dá)，實(shí)現(xiàn)T細(xì)胞功能改造；改造后的CAR-T細(xì)胞可特異性識(shí)別腫瘤/病變細(xì)胞抗原，激活殺傷活性以實(shí)現(xiàn)靶向清除。

該療法省去“體外采集-基因改造-擴(kuò)增-回輸”的復(fù)雜流程，僅需單次注射即可啟動(dòng)治療，大幅縮短治療周期，既降低對(duì)自體T細(xì)胞質(zhì)量的依賴、拓寬適用人群，又能規(guī)避傳統(tǒng)療法清淋預(yù)處理引發(fā)的感染等多重安全風(fēng)險(xiǎn)。

當(dāng)前，國(guó)內(nèi)外藥企的InvivoCAR-T療法，已紛紛進(jìn)入臨床研究階段。在此趨勢(shì)下，藥康生物不僅可供應(yīng)高質(zhì)量免疫系統(tǒng)人源化小鼠模型，更搭建了適配Invivo CAR-T療法的非臨床前藥效評(píng)價(jià)體系，既能精準(zhǔn)化、系統(tǒng)化評(píng)估其療效，還可驗(yàn)證非臨床前的體內(nèi)基因編輯效率及CAR表達(dá)效果，為新藥研發(fā)進(jìn)程提速。

數(shù)據(jù)分享

人源PBMC重建NCG-MHC-dKO小鼠體內(nèi)藥效評(píng)價(jià)

實(shí)驗(yàn)流程：將Nalm6-Luc腫瘤細(xì)胞尾靜脈接種于NCG-MHC-dKO小鼠，腹腔注射2×107PBMC后，腹腔注射給予抗CD19-CAR慢病毒載體（圖2A）；通過(guò)流式檢測(cè)人T細(xì)胞的CAR表達(dá)以確認(rèn)體內(nèi)編輯成功（圖2E），借助活體成像監(jiān)測(cè)腫瘤負(fù)荷（圖2B）。

圖2 InvivoCAR-T在huPBMC-NCG-MHC-dKO小鼠中的藥效評(píng)價(jià)（合作驗(yàn)證數(shù)據(jù)）

如圖2所示：該模型中InvivoCAR-T治療組對(duì)Nalm6-Luc腫瘤呈現(xiàn)顯著生長(zhǎng)抑制，治療組生存期延長(zhǎng)；對(duì)照組無(wú)抑瘤效果，進(jìn)一步驗(yàn)證了藥物有效性（圖2C和圖2D）；同時(shí)，治療組檢測(cè)到人T細(xì)胞的CAR表達(dá)（圖2E）。

人源HSC重建huHSC-NCG小鼠體內(nèi)藥效評(píng)價(jià)

以UB-VV100載體（治療B細(xì)胞惡性腫瘤的臨床候選藥物，編碼CD19-CAR）的評(píng)價(jià)為例：在該模型中，腹腔注射給予不同劑量的UB-VV100后，流式檢測(cè)顯示B細(xì)胞呈劑量依賴性清除（圖3B），且CAR-T細(xì)胞比例隨載體劑量升高而增加（圖3C）。該模型可有效評(píng)估CAR-T藥物的靶向清除功能和體內(nèi)動(dòng)力學(xué)行為。同時(shí)，該模型也可結(jié)合CDX/PDX模型，拓展至其他非B細(xì)胞靶點(diǎn)藥效評(píng)價(jià)測(cè)試。

圖3 In vivo CAR-T在huHSC-NCG小鼠中的藥效評(píng)價(jià)
（圖片來(lái)源：J Immunother Cancer. 2023 Mar;11(3):e006292.）

InvivoCAR-T技術(shù)正推動(dòng)細(xì)胞治療完成從“復(fù)雜定制化工程”到“便捷通用型藥品”的跨越，是下一代免疫治療的核心發(fā)展方向之一。但這一技術(shù)的臨床轉(zhuǎn)化，高度依賴臨床前研究對(duì)其在復(fù)雜人體環(huán)境中行為的精準(zhǔn)預(yù)測(cè)。

目前，國(guó)內(nèi)部分優(yōu)質(zhì)CRO企業(yè)，可為相關(guān)研究提供精準(zhǔn)人源化小鼠模型。比如藥康生物構(gòu)建的免疫系統(tǒng)人源化模型，為研究InvivoCAR-T藥物的有效性、持久性及安全性研究，提供了系統(tǒng)、可靠且高效的非臨床評(píng)價(jià)載體；同時(shí)，藥康生物還可提供非臨床前藥效評(píng)價(jià)的一站式服務(wù)，從模型供應(yīng)到數(shù)據(jù)產(chǎn)出全流程支持，助力InvivoCAR-T療法的研發(fā)與轉(zhuǎn)化進(jìn)程加速。

附表：