浙江
首先明確兩個概念：
激發光：給染料「充電」的光，由儀器激光器提供;
發射光：染料釋放能量的光，就是我們檢測到的信號
不同染料對應不同的激發 / 發射波長，要和儀器通道精準匹配 。下面是核心選擇邏輯：
1、首先看儀器配置 有什么激光、什么通道，就配什么熒光。 先確認你流式儀的激光器（405、488、561、640/638nm 等）和對應通道，這是選染料的前提！
2、激發匹配 熒光素激發峰 ≈ 激光波長 熒光素的激發峰要盡量靠近激光波長，激發效率才最高 例：PE（激發峰～565nm）優先配 561nm 激光，沒有就用 488nm 替代 熒光發射峰落在通道濾光片范圍內。
3、看表達強弱，強弱配對 這里匯總了常見的熒光染料的亮度情況 超亮組：PE、PE-Cy7、APC、APC-Cy7、BV421/BV510 高亮組：PerCP-Cy5.5、Alexa Fluor 647 中亮組：FITC、Alexa Fluor 488 低亮組：PerCP、PI（僅死活染色） 例如 高表達抗原（如 CD45、CD3）→ 配中等 / 低亮度染料（FITC、PerCP） 低表達抗原（如轉錄因子、細胞因子）→ 配高亮度染料（PE、APC、PE-Cy7）。
4、要注意！減少光譜重疊 共表達的標記（比如同一個細胞上同時染 CD4 和 CD8），盡量選光譜分離度高、重合度低的組合，避免補償過大 例如：PE + APC 比 FITC + PE 更友好。
編輯：冷漠小 z
內容來源：丁香大師姐（小紅書）
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