差點漏診！常規地貧基因檢測“陰性”，為何我仍建議她丈夫也來查

* 僅供醫學人士參考

地中海貧血是一種遺傳性血紅蛋白合成障礙導致的溶血性貧血，因最早發現于地中海沿岸地區而得名（又稱“海洋性貧血”）。

其本質是珠蛋白基因缺陷，導致血紅蛋白中的珠蛋白鏈合成減少或不合成，引發紅細胞破壞加速（溶血）和無效造血。根據受影響的珠蛋白鏈類型，通常主要分為α、β、γ、δ、δβ等幾類。

紅河州地處云南省東南部邊境，本實驗室歷史檢測數據顯示地中海貧血攜帶率高達20.91%。筆者在工作中曾接觸過類似案例，現將其確診過程整理分享，供參考。

案例經過

患者基本情況

女，33歲，因停經18+3周，于2024年1月22日于紅河州婦幼保健院就診，平素月經規律，月經周期為28～29d，末次月經為2023年9月1日，孕l產0。意識清醒，無惡心、嘔吐，無發熱，無腹痛、陰道出血，外院血常規結果檢查正常。問診時孕婦表述母親有貧血史，具體原因未明，接診醫生與檢驗人溝通后，為排除家族遺傳，開具血常規、血清鐵及鐵蛋白檢測的同時，加查血片觀察和血紅蛋白電泳檢測。

相關檢查

2024年1月22日血常規結果、血清鐵和鐵蛋白檢測無明顯異常，結果如圖1、圖2。血涂片檢查可見紅細胞大小均一，中央淡染區無擴大，形態規則，紅細胞體積正常，結果如圖3。

圖1

圖2

圖3

2024年1月23日血紅蛋白電泳結果提示HbA?減低，HbF升高，血紅蛋白電泳異常，如圖4。

圖4

結果分析

該孕婦血常規結果血紅蛋白＞110g/L，平均紅細胞體積（MCV）＞80 fL、平均血紅蛋白量（MCH）＞27 pg，鐵蛋白＞20 ng/mL，血涂片結果紅細胞大小均一，形態規則，中央淡染區無擴大，根據指南 [1] ，可排除缺鐵性貧血。

血紅蛋白電泳是地中海貧血的初篩手段，相關研究表明，血常規正常但電泳異常仍可能提示地貧，而在電泳異常患者中，約50.62%為地貧基因陽性 [2] ，故于1月26日對該孕婦加測常規型地貧基因檢測。

選用亞能試劑，采用反向點雜交法檢測3種常見缺失型α地貧--SEA/αα，－α3.7/αα，－α4.2/αα地貧，3種常見突變型α地貧αQSα,αCSα,αWSα和常見的17種β-地貧點突變，檢測結果未見異常，結果如圖5。

圖5

孕婦血紅蛋白電泳檢測提示HbA?減低較明顯，考慮α地貧，但常規基因型檢測未見異常，加做其他常見型α地貧--THAI，21.9缺失和27.6缺失。瓊脂糖凝膠電泳跑膠結果無－-THAI,21.9 缺失和27.6 缺失，結果如圖6。

圖6

因孕婦均未檢測到3種常見α基因缺失，3種常見α基因突變，17種常見β-地中海貧血基因突變及--THAI，21.9缺失和27.6缺失，而血紅蛋白電泳結果與基因型不符合，檢驗醫師經分析懷疑孕婦為罕見型地中海貧血攜帶者，進一步與患者和臨床醫師溝通后，加做一代測序（Sanger測序）對DNA序列進行測定。1.Sanger基因測序在HBD基因區域檢出-77(T>C）雜合突變，該突變HGVS命名為HBD:c.-127T>C，結果如圖7。

圖7

臨床價值

該突變不會產生明顯的臨床癥狀，位于HBD基因啟動子區（轉錄起始位點上游127bp），是中國人群中最常見的HBD基因突變 [3] ，屬于δ-地中海貧血（δ-thalassemia）相關非編碼區單核苷酸變異（SNV），HBD基因突變可能會導致HbA2的下降和HbF的上升 [4] 。

有研究結果顯示，96位突變攜帶者，HbA?平均值為1.4±0.2% [5] ，HbF輕度升高，通常<5.0% [4] 。該突變會影響DNA和蛋白質的結合，從而影響基因表達 [6] 。當δ鏈減少（HbA?↓）與β鏈嚴重缺乏（HbA↓）疊加，加重α鏈過剩，形成更多包涵體，導致溶血和無效造血。

據報道 [7] ，雜合子個體無明顯臨床癥狀，僅表現為HbA? 水平降低，血液學指標（如Hb、MCV、MCH等）與正常人群無顯著差異；純合子個體表現為HbA?完全缺失 [8] ，但血紅蛋白總量（Hb）仍在正常范圍，無明顯貧血癥狀，紅細胞形態無顯著異常，日常生活不受影響；但當該雜合子（HbA?↓）合并β-地中海貧血（HbA?↑）突變時，HbA?可能表現為正常或輕度減低，進而掩蓋β-地中海貧血的篩查。

綜合以上檢查結果，檢驗醫師告知臨床醫生該孕婦為δ-地中海貧血攜帶者，該貧血為輕型地貧，攜帶者無明顯臨床癥狀。但若配偶為β-地中海貧血攜帶者，根據遺傳規律 [9] ，胎兒有攜帶δ-地中海貧血及β-地中海貧血的風險，因兩者同時攜帶時會掩蓋β-地中海貧血的篩查，造成β-地中海貧血漏診，建議加查配偶地中海貧血基因檢測。醫生與孕婦及家屬溝通后，孕婦丈夫加查地貧基因型進行檢測，地貧基因檢測結果為βE雜合突變。綜合夫妻雙方地貧基因檢測結果，建議胎兒出生后加查地中海貧血基因第二代測序，避免漏診。

知識拓展

常規的地中海貧血基因檢測一般只包括常見的3種α基因缺失，3種α基因突變和17種β-地中海貧血基因突變。罕見地貧是除外常規中國人群篩查的23種基因型地貧。罕見地貧是由珠蛋白基因簇的罕見突變或特殊組合導致的地貧亞型，其核心特點是發生率低 [10] ；分子機制復雜：罕見突變可能涉及未知基因區域 [3] （如啟動子、增強子突變），需通過全基因測序才能發現；表型與基因型不匹配：同一罕見突變在不同個體中可能表現不同 [11] （如受修飾基因或環境影響），常規檢測易漏診，需結合高精度分子診斷技術（如二代/三代測序）才能明確診斷。

總結

中國人群地貧基因攜帶者約有 3000 萬人，中國南方（廣西、廣東等）攜帶率超 10% [12] 。重型患兒終身治療費用超 100 萬元，造成家庭與社會沉重的經濟負擔。

現階段常見地貧基因突變明確、發病率高，已形成 “篩查－診斷－防控－治療” 的完整體系。但篩查范圍有限，不能完全排除罕見地貧攜帶者。罕見地貧突變多樣、病例稀少，其分析對患者現階段的治療和產前診斷都具有重要意義。

在臨床診治和實驗室檢測過程中，為防止罕見地貧的漏診和誤診，應盡可能多地收集患者相應的臨床表型資料，如常規地貧基因檢測、血細胞分析、血紅蛋白電泳、血清鐵檢測、鐵蛋白檢測。若發現基因型和臨床表型不相符等情況，應高度懷疑其攜帶罕見地貧基因，并根據其表型特點選擇合適的檢測方法，以提高罕見地貧基因的檢出效率。

新興測序技術的發展，彌補了常規地貧篩查在罕見突變檢測、復雜基因型分析應用中的不足，特別適合高發地區大規模篩查、產前診斷及疑難病例確診。但需注意，測序成本較高，在基層篩查中可結合常規方法，采用 “初篩 + 測序復核”的組合策略，這對充分發掘地貧遺傳資源、促進全面防控具有重要作用。

參考文獻：

[1] 齊薇薇，邵宗鴻.《妊娠期鐵缺乏和缺鐵性貧血診治指南》解讀[J].中國實用內科雜志, 2014, 35(2):136-138.DOI:10.3760/cma.j.issn.1007-9408.2014.07.006.

[2] 龐雪利,杜紅飛,陽燕,等.異常血紅蛋白電泳原因分析[J].中國實驗血液學雜志, 2023, 31(3):830-836.

[3] Chen M, Huang H, Chen L, et al. First report of the spectrum of δ-globin gene mutations among women of reproductive age in Fujian area-Discrimination of δ-thalassemia, α-thalassemia, and Iron Deficiency Anemia. J Clin Lab Anal. 2020;34(11):e23479.

[4] 陳曉俊，江帆，周劍英，等。中國廣東人群δ地中海貧血基因譜和血液學表型研究[J].中華檢驗醫學雜志, 2024, 47(01):49-56.DOI:10.3760/cma.j.cn114452-20231031-00246.

[5] Liu N, Xie XM, Zhou JY, et al. Analysis of δ-globin gene mutations in the Chinese population. Hemoglobin. 2013;37(1):85-93.

[6] Nakamura T, Takihara Y, Ohta Y, et al. A delta-globin gene derived from patients with homozygous delta zero-thalassemia functions normally on transient expression in heterologous cells. Blood. 1987;70(3):809-13.

[7] Zhong L Y , Xie Y J , Chen P S ,et al.[Analysis of haematological phenotype and mutation spectrum of δ-globin gene from Guangdong area in Chinese Han prenatal population].[J].Zhonghua Yi Xue Za Zhi, 2017, 97(20):1580.DOI:10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2017.20.016.

[8] Tang H S , Wang D G , Huang L Y ,et al.δ-Thalassemia with Complete Absence of Hb A2 in a Chinese Family[J].Hemoglobin, 2018:1-3.DOI:10.1080/03630269.2018.1463916.

[9] 徐湘民.地中海貧血預防控制操作指南[M].人民軍醫出版社,2011.

[10] 鞠愛萍,付曉彤,林鏗,等.廣州市花都地區育齡人群常見和罕見地中海貧血基因型分析[J].中國實驗血液學雜志, 2024, 32(5):1496-1502.

[11] Gong Y , Zhang X , Zhang Q ,et al.A natural DNMT1 mutation elevates the fetal hemoglobin via epigenetic de-repression of γ-globin gene in β-thalassemia[J].Blood, 2020, 137(12).DOI:10.1182/blood.2020006425.

[12] 涂兆宇,吳文裕,吳二娜,等.《中國地中海貧血藍皮書（2020）》[J].中國社會組織, 2021(6):3.

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本文來源：檢驗醫學網

責任編輯：葉子

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