近日,南京農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院滕年軍教授和吳澤副教授團(tuán)隊(duì)在《JIPB》發(fā)表題為“LlSAPK2 confers thermotolerance in lily by phosphorylating and stabilizing LlbZIP46”的研究成果。南京農(nóng)業(yè)大學(xué)博士研究生方倩倩、碩士研究生張丹丹和祖站禮為論文共同第一作者,吳澤副教授和滕年軍教授為共同通訊作者。
該研究發(fā)現(xiàn),百合LlSAPK2在高溫處理后激酶活性顯著增強(qiáng)。利用TRV介導(dǎo)的病毒誘導(dǎo)基因沉默(VIGS)技術(shù)沉默LlSAPK2后,百合植株在高溫條件下表現(xiàn)出更嚴(yán)重的細(xì)胞膜損傷和ROS積累,并伴隨著多個A類HSF基因表達(dá)下調(diào)。相反,LlSAPK2過表達(dá)百合植株表現(xiàn)出顯著增強(qiáng)的基礎(chǔ)耐熱性和獲得性耐熱性。隨后通過酵母雙雜交(Y2H)篩庫獲得了一個與LlSAPK2互作的轉(zhuǎn)錄因子LlbZIP46。LlSAPK2能夠直接磷酸化LlbZIP46,并且熱脅迫下LlbZIP46的磷酸化由LlSAPK2介導(dǎo)。通過LC-MS/MS分析,鑒定出LlbZIP46多個潛在磷酸化位點(diǎn)。進(jìn)一步的定點(diǎn)突變和蛋白穩(wěn)定性分析表明,LlSAPK2介導(dǎo)的磷酸化對于維持熱脅迫下LlbZIP46穩(wěn)定性至關(guān)重要。LlbZIP46能夠結(jié)合LlHSFA3B啟動子中的順式作用元件且顯著激活LlHSFA3B啟動子活性。LlSAPK2可以促進(jìn)LlbZIP46對LlHSFA3B啟動子的結(jié)合能力,進(jìn)一步促進(jìn)LlHSFA3B的轉(zhuǎn)錄表達(dá)。
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